摘要:

    目的研究晚期氧化蛋白产物对人巨噬细胞产生一氧化氮（NO）和活性氧（ROS）的影响以及复方黄甘提取物（大黄、甘草等）对其的干预。方法人巨噬细胞与晚期氧化蛋白产物共同培养24 h,再给予复方黄甘提取物继续培养24 h后,用Griess还原法测定培养上清一氧化氮（NO）的水平变化,RT-PCR法测定诱导型一氧化氮合酶（iN-OS）的基因表达变化,DCFH-DA荧光探针法测定ROS水平的变化;分别用NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐、NADPH氧化酶抑制剂二亚苯基碘和复方黄甘提取物预处理细胞1 h,再用晚期氧化蛋白产物刺激,24 h培养结束后测定ROS水平的变化,RT-PCR和ELISA法分别测定细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的基因表达及蛋白分泌。结果晚期氧化蛋白产物丧失了诱导人巨噬细胞产生NO的能力,但能升高ROS的产生量,同时TNF-α、IL-1β和IL-6的基因表达和蛋白分泌也显著性升高。当给予复方黄甘提取物继续培养后,可显著性地增加NO水平,降低ROS水平;当给予复方黄甘提取物预处理细胞时,也能降低ROS水平,同时降低TNF-α、IL-1β和IL-6的基因表达和蛋白分泌。结论复方黄甘提取物延缓肾衰的进程可能是通过产生NO来减轻其微炎症反应和通过消除ROS来减弱其氧化应激损伤途径实现的。