葛根素抑制HCY所致血管内皮细胞凋亡及其相关机制的研究
作者:
沈晓君
[1] ;
魏晏
[1] ;
何航
[1] ;
陈芳
[2]
关键字:
葛根素
同型半胱氨酸
血管内皮细胞
葡萄糖调节蛋白78
组织原位杂交
摘要:
目的:差异筛选葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein78,GRP78)基因,观察其在动脉粥样硬化(athemsclero-sis,AS)病灶中的表达水平,探讨葛根素抗AS的可能机制。方法:建立同型半胱氨酸(homocysteinemia,HCY)诱导的人主动脉血管内皮细胞损伤模型,与不同浓度葛根素(10-7mol/L、10-6mol/L、10-5mol/L)共同培养48h,Annexin V-FITC检测血管内皮细胞凋亡率,RT-PCR筛选差异表达的GRP78基因片段,制备地高辛标记探针,高脂饲料复制兔AS模型,主动脉组织原位杂交检测GRP78mRNA表达水平。结果:经葛根素处理48h后,各组血管内皮细胞凋亡率均低于HCY组(P〈0.05、P〈0.01),且随葛根素剂量增加而减少;筛选出全长648bp的基因片断与兔葡萄糖调节蛋白78基因高度同源,组织原位杂交显示该基因在AS病灶血管内皮细胞胞质中高表达。结论:GRP78基因参与AS病变形成;葛根素拮抗HCY诱导的血管内皮细胞凋亡,下调GRP78基因表达水平可能是其作用机制之一。